產(chǎn)品詳情
miRNA熒光定量檢測服務(wù)常有兩種檢測方法
1)探針法
PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步。
2)miRNA熒光定量檢測服務(wù)染料嵌入法
使用熒光染料SYBR或EVGreen。熒光染料可以結(jié)合到雙鏈DNA上面,當體系中的模板被擴增時,熒光染料可以有效結(jié)合到新合成的雙鏈上面,隨著PCR的進行,結(jié)合的熒光染料越來越多,被儀器檢測到的熒光信號越來越強,從而達到定量的目的。
miRNA熒光定量檢測服務(wù)
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